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权威发布科学防治禽流感

作者: admin 时间:2018-09-05 来源:未知
摘要:禽流行性感冒(AvianInfluenza,AI)是由A型流感病毒引起的一种禽类的感染和/或疾病综合征。1878年,首次报道在意大利鸡群暴发的一种严重疾病,当时称为鸡瘟 ,即所谓的真性鸡瘟或欧洲鸡...

禽流行性感冒(AvianInfluenza,AI)是由A型流感病毒引起的一种禽类的感染和/或疾病综合征。1878年,首次报道在意大利鸡群暴发的一种严重疾病,当时称为鸡瘟 ,即所谓的“真性鸡瘟或欧洲鸡瘟”。1955年证实“鸡瘟”的病原为A型流感病毒感染。1981年在美国马里兰州召开的首届禽流感学术会议上建议取消“鸡瘟”这一病名,改称高致病性禽流行性感冒,并建议用标准操作程序来确定分离毒是否属于HPAI病毒。至今,该病几乎遍及世界各地。世界各地已分离出上千株的禽流感病毒。病毒广泛分布于各种家禽(火鸡、鸡、珍珠鸡、石鸡、鹌鹑、野鸡、鹧鸪、鸽、鹅及鸭)和野禽(包括鸭、鹅、矶鹬、燕鸥、鹭、海鸥、天鹅等)。从迁徙水禽,尤其鸭中分离的病毒最多,流感在家禽中对鸡和火鸡的危害最严重。禽流感暴发造成的损失是巨大的,近年来国外及我国有不少禽流感感染人的报道,人感染后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等,多数伴有严重的肺炎,严重者心、肾等多种脏器衰竭导致死亡,病死率很高。因此本病倍受人们关注。
 
1临床症状
  禽流感(AI)的潜伏期从几小时到几天不等,其长短与病毒的致病性高低、感染强度、传播途径和易感禽的种类有关。由A型AIV所引起的禽流感,因感染禽的种类、年龄、性别、并发感染情况及所感染毒株的毒力和其他环境因素等不同而表现出的症状很不一致。  病禽主要表现为呼吸道、消化道、生殖道及神经系统的症状。一般说来,没有特征性的症状。病禽呈现体温升高,精神沉郁,羽毛松乱,喜卧不动,饮食欲减少。母鸡产卵量下降,下降幅度不等,毕英佐等1994年报道,下降15%~35%;张泽纪等报道,产蛋下降14%~75%。呼吸道症状表现明显,如咳嗽、喷嚏、罗音,呼吸困难,重者张口呼吸或有尖叫声。病禽流泪,羽毛松乱,身体蜷缩。头和颜面部水肿、冠和肉垂发绀。有神经症状,共济失调,不能走动和站立。有的见下痢。以上这些症状可能单独出现,或几种同时出现。  当出现急性暴发时,没有明显症状即可见到鸡只死亡。因毒株的致病力不同,死亡率从0%~100%不等。同时,不同种类的禽种易感性也不同,如H5N8亚型对火鸡致病,对鸭则不致病。野生鸟类的流感病毒感染,一般没有明显症状,但燕鸥感染A/tern/SouthAfrica/1/61(H5N3)时可引起大量死亡。    


2病理变化
  禽流感的病理变化因感染病毒株毒力的强弱、病程长短和禽种的不同而变化不一。  高致病性AIV的主要特征是暴发时的突然死亡和高死亡率。其组织病变主要是坏死,而且严重并涉及到脑、皮肤及多个内脏器官。  与此相反,由低毒力毒株引起的蛋鸡及火鸡的AIV流行主要临诊特征是:死亡率无明显升高,而产蛋率、受精率及孵化率下降。最常见的大体病变是卵巢退化、出血和卵子破裂,内脏的尿酸盐沉积(内脏型痛风),肾脏肿大,肺充血和水肿,气管炎,肠炎及气囊炎。其他常见的变化是输卵管发炎,“蛋性腹膜炎” (Eggperitonitis),肾小管坏死,肝脏坏死及肺炎,说明低毒力株主要侵害泌尿生殖道。  (一)肉眼病变  在很多病情较轻的病例中,大体病变往往不太明显。可能有轻微的窦炎,表现为卡他性、纤维素性、浆液性/纤维素性、脓性或干酪性炎症。气管粘膜有轻度水肿,并有数量不等的浆液性或干酪样渗出物。气囊炎,表现囊壁增厚,或有纤维素性及干酪样渗出物。病禽还可见纤维素性腹膜炎及“蛋性腹膜炎”。火鸡还能见到卡他性或纤维素性肠炎和盲肠炎。蛋鸡的卵泡变形、萎缩,输卵管也可见到渗出物。  如果感染高致病性毒株,因死亡很快,可能见不到明显的病变。但有些毒株也可引起某些非特征性的充血、出血及局部坏死等病变,如A/turkey /Ontario/7732/66(H5N9)、A/tem/SouthAfrica/61(H5N3)及Aicken/Pennsylvania /83(H5N2)等毒株。病变还可包括头面部水肿,窦炎和肉垂、冠发绀、充血。内脏的变化差异较大。人工感染禽流感病毒(H7N7)可见到肝、脾、肾的坏死灶,有些毒株(H5N3)则没有前述变化。  部分毒株除产生头部水肿、发绀外,内脏还可见到较明显的出血,包括浆膜及粘膜面的小点出血;十二指肠和心外膜出血;肌胃与腺胃交接处的乳头及粘膜严重出血;扁桃体肿大及出血。  (二)病理组织学变化  禽流感的特征性病理组织学变化为水肿、充血、出血和“血管套”(血管周围淋巴细胞聚积)的形成,主要表现在心肌、肺、脑、脾等。肝、脾及肾有实质性变化和坏死。脑的变化包括:坏死灶、血管套、神经胶质细胞增生等从轻微到严重的非化脓性脑炎。此外.还有严重的坏死性胰腺炎和心肌炎。
3诊断鉴别
  对禽流感及时而正确的诊断十分重要,以能采取果断的控制措施。本病必须进行综合分析,尤以实验室诊断最为重要。  (一)现场诊断  根据流行病学,临诊症状及剖检变化只能作出可疑诊断。由于禽流感的现场表现(发病特点、症状及剖检变化)差异较大且无典型性,所以要确诊必须依靠病原分离鉴定及血清学试验。  (二)病原分离、鉴定  A型流感病毒常在呼吸道或/和消化道中复制增殖,所以,活禽采集病料多从喉头、气管或泄殖腔中采集。死禽采集气管、肺、肝、脾、肾等组织样品。  以棉花或其他材料制成的拭子、器具采集病料样品,放入加抗生素的无菌肉汤或20%~50%甘油生理盐水中。最好低温(4℃)或-70℃下保存,以液态氮或干冰较好。病料样品在保存或运送前可先行处理,制成10%的悬液,并进行低速离心澄清。  经离心的病料上清液接种SPF鸡胚,取0.1ml,经尿囊腔途径接种(或同时羊膜腔接种)9~11日龄的鸡胚,置37℃孵育3~7天,弃去24h内死亡的胚,收集48h至96h的胚液和绒毛尿囊膜作无菌检查,检查鸡胚尿囊液对红细胞的凝集活性,血凝阴性者,用尿囊液盲传2~5代,如仍未出现血凝时,判为阴性,弃去。如出现血凝活性则进一步检查。  一般说来,如果样品中有病毒存在,初次传代后就足以产生红细胞凝集作用。出现血凝活性的病毒量一般为10-5~10-6EID50/ml。  用于病毒鉴定的标准方法是以鸡红细胞来检测胚液的血凝活性,常量法和微量法都可便用。  确定尿囊液或其他胚液的血凝活性后,还要鉴别是否由副粘病毒鸡新城疫病毒(NDV)所致。因此,首先要用ND抗血清作HI试验,以排除NDV的可能性。如果NDVHI阴性,才可以进行下一步工作,即确定A型流感病毒NP抗原的存在。可用血清学方法,如双向双扩散、免疫电泳、或单辐射溶血试验等方法来检测型特异性的核心抗原NP或MP。A型流感病毒都具有相同的型特异性抗原。  鉴定程序下一部工作是确定血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)这两种表面抗原的亚型。用一系列制备好的抗不同血凝素的抗血清以HI试验来测定其HA的型别。  NA亚型通常用制备的抗9种(或10种)已知神经氨酸酶的抗血清鉴定。微量神经氨酸酶抑制试验(NI)操作更简便。已知目前的HA亚型达16种,NA也达了10种亚型。  目前国内只有极少数实验室具备鉴定的条件,可将待检材料送往有条件的专业实验室去进行病毒分型鉴定。  (三)血清学试验  1.血凝试验与血凝抑制试验用血凝试验和血凝抑制试验(HI)可证实流感病毒的血凝活性及排除NDV。简单的方法是:取1滴1:10稀释的正常鸡血清(最好是SPF鸡)和1滴ND抗血清,分别滴于瓷板上,再各加1滴有血凝活性的鸡胚尿囊液,混匀后各加1滴5%的鸡红细胞悬液,若两份血清均出现血凝现象,则表明尿囊液中不含有新城疫病毒(NDV);如果ND抗血清出现HI现象,表明尿囊液中含NDV。  血凝和血凝抑制试验操作相对繁杂一些,加上需制备抗血清,所以也较费时间。但特异性较好,是亚型鉴定中必须进行的项目。用于型的鉴定就不如琼脂扩散试验那样简便和快捷。  2.琼脂凝胶扩散试验在琼脂凝胶中进行的抗原抗体反应比较简便、快捷,既可以定性(如免疫双扩散及免疫电泳中以沉淀线判定),又可以定量(如单辐射扩散)。  琼脂扩散(AGP)试验最常用的是双向双扩散(或称免疫双扩散)。即用已知的阳性和阴性血清与待检抗原及已知抗原,在琼脂凝胶中进行免疫双扩散。室温下作用24h,已知抗原和阳性血清之间应出现明显的沉淀线,48h内都应很清晰。当待检抗原与阳性血清间出现沉淀线,并且沉淀线与邻近的阳性抗原和抗血清的沉淀线相连,即可判定为阳性反应,待检抗原即为A型禽流感病毒。这是国内目前普遍采用的方法。  除了双向双扩散试验(IDD)外,在凝胶中进行的免疫沉淀试验还有:免疫单辐射扩散试验(SRD),即制胶时先加入抗原或抗体的一种,而让另一种在凝胶中进行扩散。这种方法还可以定量测定抗原或抗体的量。这种方法还可以称作被动溶血试验,即单辐射溶血试验(SRH),此时凝胶中要加入红细胞,在补体存在下抗原抗体复合物使沉淀环出现溶血现象,也可对抗原或抗体进行定量。  免疫电泳试验也可用于AIV及其抗体的检测,使用较多的是对流免疫电泳(CIE)。  几种方法相比较,免疫双扩散(IDD)要比SRD更简便一些,但其敏感性不如SRD好。但SRD需对抗原进行裂解处理,操作较为复杂。SRH的敏感性类似SRD,比IDD要高,但操作更复杂,其优点在于可定量分析。  对流免疫电泳(CIE)是这几种方法中最为敏感的一种,而且操作简单,时间最快,1h即可出结果。  3.中和试验以中和试验(NT)来鉴定或滴定流感病毒时。常用鸡胚或组织培养细胞,操作方法与其他病毒(如NDV)的中和试验相同。  中和试验作为经典的方法在病毒鉴定中是相当重要的,很多新的检测方法都要以之为标准来进行比较。但其操作相当繁琐,所费时间也较长,试验材料耗费也多,故不常进行。  4.免疫荧光技术免疫荧光技术即荧光抗体技术,最早用于流感病毒是鉴定和定位病毒感染细胞中特异性的抗原,主要是流感病毒的NP或MP抗原。用NP抗原的荧光抗体染色,主要出现核内荧光;用抗原的荧光抗体主要出现胞质荧光,核内也有部分荧光。  用于禽流感病毒的诊断,常用直接荧光抗体法,即在组织触(印)片上直接染色,以荧光显微镜检查荧光,一种AIV的荧光抗体可以用来检测同亚型的其他病毒。荧光抗体技术用干诊断,具有快速、简便、敏感等特点,而且费用较低。需要注意的是,如何避免或降低标本中出现的假阳性问题(非特异性荧光)。  5.酶免测定技术酶免测定技术(EnzymeImmunoAssays),也称酶联免疫吸附法(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,ELISA),是用酶来标记抗原或抗体,通过显色反应来检测相应抗体或抗原的一种方法。  ELISA具有较高的敏感性,既可以检测抗体,又可以检测抗原。尤其适合于大批样品的血清学调查。可以标准化而且结果易于分析。在流感的控制、扑灭、检疫中很有用途。  试验表明,直接ELISA可于感染后6天检出AIV的抗体,敏感性也高于AGP及HI试验。  简单程序(直接ELISA)为;从感染尿囊液中超速离心制备抗原,以抗原包被酶标反应板,加人待检血清后,再加入抗抗体(酶标),最后以酶标仪检测结果。  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所于已开发出ELISA和Dot-ELISA诊断试剂盒可供诊断用。  6.聚合酶链反应(PCR)农业部动物检疫所吴时友等建立了从病料中核测AIV的PCR方怯。哈尔滨兽医研究所于康震等也建立了PCR和反转录-聚合酶链反应(RTPC)诊断法。PCR方法敏感性较高,为AIV从病料中快速检出提供了方法。
4防治措施
  禽流感是世界性分布的疫病,对该病的防制各个国家都很重视,我国应该从多方面采取严加防范的措施,否则,该病一旦爆发,造成的经济损失将是无法估计,对养禽业可造成毁灭性的打击。 
 1.防止AI从国外传入我国。
  2.一旦发生可疑禽流感时,要组织专家及早确诊,鉴定所分离的禽流感病毒的血清亚型、毒力和致病性。划定疫区,严格封锁,扑杀所有感染HPAIV的禽类并进行彻底的消毒,按照我国动物卫生法和农业部的要求,严格执行防疫措施。     3.各地在引进禽类及其产品时一定要来自无禽流感的养禽场。 
4.治疗方法:可用禽安康肽,肌肉注射;流行性感冒1ml/kg,新城疫、副粘病毒、病毒性呼吸道等0.5ml/kg,预防量减半。治疗时最好搭配地塞米松和全能菌克,每瓶建议加地塞米松20mg!或者新感康饮水,本品每套用于成禽1000羽、雏禽2000羽,1次/天,3-4小时集中饮水,连用2-3天,为一个疗程。重症可酌情加量。
 
 

5病原
  (一)分类及命名  禽流感病毒为正粘病毒科流感病毒属的成员,根据流感病毒核蛋白(NP)和基质蛋白(MS)抗原性的不同,可将流感病毒分为A、B和C3个血清型。A型流感病毒能感染多种动物,包括人、禽、猪、马、海豹等;B型和c型则主要感染人。而且A型流感病毒的表面糖蛋白比B型和c型的变异性高。  根据流感病毒的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的抗原性差异,可将A型流感病毒分为不同的亚型。迄今为止,A型禽流感病毒的HA已发现14(或16)种,NA有9(或10)种,分别以H1~H14、N1~N9命名。不同的H抗原或N抗原之间无交叉反应。  所有的禽流感病毒均属A型。不同毒株的致病性有差异。根据A型流感各亚型毒株对禽类的致病力的不同,将禽流感病毒分为高致病性病毒株、低致病病毒株和不致病病毒株。历史上高致病性的禽流感病毒都是由H5和H7引起的。当然,并非所有的H5和H,都是强毒。证明为高致病的毒株还是少数。
 
6传播途径
  分布禽流感病毒呈世界性分布。易感动物家禽和野禽、鸟类都对禽流感病毒敏感。家禽中火鸡、鸡、鸭是自然条件下最常受感染的禽种。感染途径和传播方式家禽流感的传染来源较多,可来自感染或发病的家禽、其他种类的家禽,来自外来捕获的鸟、野生鸟类、移徙的水禽及其他动物。病毒通过病禽的分泌物、排泄物和尸体等污染饲料、饮水及其他物体,通过直接接触和间接接触发生感染,呼吸道和消化道是主要的感染途径。人工感染途径包括鼻内、气管、结膜、皮下、肌肉、静脉内、口腔、腹腔、气囊、泄殖腔、颅内及气溶胶等途径均获成功。由于感染能从粪便中大量排出病毒,污染一切物品,如饲养管理器具、设备、授精工具、动物、饲料、饮水、衣物、运输车辆等均可成为病原的机械性传播媒介。人员的流动与消毒不严可起着非常重要的传播作用。禽流感的发病率和死亡率受多种因素影响,既与禽的种类及易感性有关,又与毒株的毒力有关,还与年龄、性别、环境因素、饲养条件及水平以及并发疾病(常有大肠杆菌病及鸡新城疫的参与)有关。还应了解,流感病毒的变异率很高,即使同一毒株也会在短时内发生变异。
7人禽流感
  人类对禽流感的研究和防治工作已有100多年的历史。基因片段,除非禽流感病毒与人流感病毒发生基因重组,否则它很难侵犯人类,导致人与人间传播。人禽流感的发生,只可能是因接触的病禽而感染。人感染病 毒的几率很小。禽流感病毒属甲型流感病毒。流感病毒属于RNA病毒的正黏病毒科,分甲、乙、丙3个型。  由于禽流感病毒的血凝素结构等特点,一般感染禽类,当病毒在复制过程中发生基因重配,致使结构发生改变,获得感染人的能力,才可能造成人感染禽流感疾病的发生。至今发现能直接感染人的禽流感病毒亚型有:H5N1、H7N1、H7N2、H7N3、H7N7、H9N2和H7N9亚型。其中,高致病性H5N1亚型和2013年3月在人体上首次发现的新禽流感H7N9亚型尤为引人关注,不仅造成了人类的伤亡,同时重创了家禽养殖业。

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